核酸提取試劑是提取生物樣本核酸的輔助試劑,研究人員利用其可以將生物樣本中的DNA、RNA提取出來(lái),用于下游實(shí)驗(yàn)室、檢測(cè)機(jī)構(gòu)。很多人都想知道常見(jiàn)核酸提取試劑有哪些?目前常見(jiàn)的核酸提取試劑有核酸提取試劑(磁珠法),核酸提取試劑(離心柱法)這兩種,下面慧慶小編就為大家介紹這兩類(lèi)試劑的提取原理以及注意事項(xiàng)。
一、核酸提取試劑的提取原理
1、核酸提取試劑(離心柱法)
核酸提取試劑(離心柱法)的是一種比較簡(jiǎn)單的用于微量核酸分離純化的方法,屬于硅吸附方法的一種,其提取原理是利用裂解液使得細(xì)胞破碎,將細(xì)胞中的核酸釋放出來(lái),然后把釋放出來(lái)的核酸特異吸附在特定的硅載體上,這種載體只對(duì)核酸有比較強(qiáng)的親和力和吸附力,而對(duì)蛋白質(zhì)、脂類(lèi)以及多糖等其他生化成分,則基本不吸附,因此離心時(shí)被甩出柱子。接著再利用洗脫液將吸附在特異載體上的核酸洗脫下來(lái),分離得到純化后的核酸。
2、核酸提取試劑(磁珠法)
核酸提取試劑(磁珠法)是目前應(yīng)用范圍比較廣的試劑,相比離心柱法,它操作簡(jiǎn)單,提取速度快、得率好、純度高,因此得到了廣泛推廣和使用。它的提取原理是運(yùn)用納米技術(shù)對(duì)超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾,對(duì)超順磁性納米顆粒的表面進(jìn)行改良和表面修飾,通過(guò)高活性的表面活性基團(tuán)與核酸分子特異性識(shí)別和快速結(jié)合。利用氧化硅納米微球的超順磁性,在變性劑(鹽酸胍、異硫氰酸胍等)和外磁場(chǎng)的作用下,能從血液、組織、食品、病原微生物等樣本中分離核酸。
二、使用核酸提取試劑的注意事項(xiàng)
1、使用核酸提取試劑之前,應(yīng)當(dāng)仔細(xì)閱讀試劑說(shuō)明書(shū),并且按照說(shuō)明書(shū)上仔細(xì)操作。
2、操作人員應(yīng)當(dāng)經(jīng)過(guò)相關(guān)培訓(xùn)且有一定的經(jīng)驗(yàn),在作業(yè)過(guò)程中需要戴好口罩、手套。
3、實(shí)驗(yàn)室所用的耗材需保證RNase free,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)當(dāng)立即清潔工作臺(tái)。
4、使用試劑前,低溫保存的核酸提取試劑應(yīng)當(dāng)恢復(fù)到室溫后再行使用,試劑應(yīng)充分混勻。
5、不同批號(hào)的試劑不能混用,超出有限期的產(chǎn)品嚴(yán)禁使用。
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